超滤管是一种实验室中常用耗材,主要用于分离和富集生物分子,如蛋白质、DNA、RNA等。它也可以用于BUFFER置换,广泛应用于生物学、分子生物学、生化等领域的研究中。润度生物UCT超滤离心管是一种优秀的超滤管产品,具有独特的设计和优点,下面将对其进行详细介绍。
润度生物UCT超滤离心管具有快速超滤功能。通过加大膜面积,小倾角结构设计能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。选择合适的超滤管是实验成功的关键,而润度生物UCT超滤管正是满足这一需求的一款优秀产品。
应用
1. 除盐、渗虑或更换缓冲液
2. 浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株 DNA/RNA样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本
3. 净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合液中去除引物、连接或分子标记,在HPLC之前去除蛋白质
产品选型表:
货号 | 产品名称 | 规格 |
UCT100 | 100KD超滤管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT050 | 50KD超滤管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT030 | 30KD超滤管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT010 | 10KD超滤管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT005 | 5KD超滤管 | 96/箱(2/包24/盒) |
技术参数:
不同膜的截留分子量 (MWCO) | 建议使用比要截留的蛋白质小2~3倍的规格 |
超滤膜材质 | modified polyethersulfone |
浓缩波保留管材质 | modified methyl methaciylate-acrylonitrile- butadiene- styreneplastic |
滤液接收离心管材质 | modified polypropyle |
离心管盖子材质 | modified polyethylene |
有效膜面积 | 9.5cm2 |
长度 | 11.8cm |
直径 | 3.5cm |
最大上样量 | 12ml |
操作温度范围 | 0~50℃ |
使用pH范围 | 1~14 |
最大离心力 | 5000xg |
灭菌 | 本超滤管未灭菌,如需无菌建议使用70%乙醇或者紫外辐照灭菌。 |
不同规格超滤管使用条件(蛋白样本、核酸样本)
MWCO | 推荐离心力 | 分子量 | 碱基对 | 碱基 |
3K | 3000~5000xg | 10k~20k | 16~32bp | 32~65bs |
5K | 3000~5000xg | 15k~45k | 25~78bp | 48~143bs |
10K | 3000~5000xg | 30k~90k | 50~145bp | 95~285bs |
30K | 3000~5000xg | 90k~180k | 145~285bp | 285~570bs |
50K | 3000~5000xg | 150k~300k | 285~475bp | 570~950bs |
100K | 1500~3000xg | >300k | 475~1450bp | 950~2900bs |
实验流程
注意:下列步骤为针对各标准品制定的最大截流及回收率流程,使用者可根据自己实验的需求进行优化。
1. 使用超滤管前,请先使用PBS或者蒸馏水润洗。此步骤可以最大化浓缩倍数。
2. 加入待离心样本,最大上样量为12mL。将盖子拧好后把超滤管放置于离心机内。将浓缩液保留管侧面透明处朝向转子中心(正视为V型结构)。此步骤可以提高效率,减少离心时间。另请注意配平以免损坏离心机。
3. 开始离心,时间及离心力根据不同规格超滤管而定,具体推荐时间及截留效果参见下列表格。
4. 离心结束后,如果样本为蛋白质溶液,可以使用分光光度计在280 nm波长处对滤液以及浓缩液进行测量。根据离心前样本浓度,离心后滤液及缩液浓度计算截留率和回收率。如果样本为核酸片段,可以使用 260 nm波长测量。
MWCO | 标准蛋白(浓度) | 分子量 | 离心时间 | 截留率(%) |
3k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 90 min | >90 |
5k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 90 min | >90 |
10k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 15 min | >85 |
30k | BSA (1 mg/mL) | 66 kDa | 15 min | >95 |
50k | BSA (1 mg/mL) | 66 kDa | 15 min | >85 |
50k | lgG (0.7 mg/mL) | 150 kDa | 15 min | >90 |
100k | lgG (0.7 mg/mL) | 150 kDa | 20 min | >85 |
100k | Thyroglubulin (1 mg/mL) | 776 kDa | 30 min | >90 |